Введення аденоасоцiйованих вiрусних векторiв у сiдничний нерв щура для оптогенетичного дослiдження
Валерiя Устименко${}^1$, Руслана Филимонова${}^2$, Валентин Яринка${}^3$, Нана Войтенко${}^4$
${}^1$Iнститут фiзiологiї iм. О.О. Богомольця НАН України;
Приватний заклад вищої освiти “Академiя Добробут”, Київ, Україна
${}^2$Київський академiчний унiверситет, Київ, Україна
${}^3$Київський академiчний унiверситет, Київ, Україна
${}^4$Київський академiчний унiверситет;
Приватний заклад вищої освiти “Академiя Добробут”, Київ, Україна
Отримано 19 квiтня 2025, у фiнальнiй формi 7 червня 2025, опубліковано 19 серпня 2025.
Анотація
Травми периферичних нервiв нерiдко супроводжується значними фiзiологiчними порушеннями або втратою функцiональностi кiнцiвки i є значною клiнiчною проблемою сучасностi, особливо в умовах ведення бойових дiй. За статистикою пошкодження периферичних нервiв у цивiльних пацiєнтiв iз травмою становить близько $2,8\%$, а актуальнi чисельнi данi серед вiйськовослужбовцiв вiдсутнi. На жаль, сучаснi методи встановлення морфофункцiонального вiдновлення нервiв не дають стабiльних результатiв та все ще потребують подальшого розвитку. У цьому дослiдженнi ми перевiряли ефективнiсть введення аденоасоцiйованих вiрусних векторiв, що забезпечують експресiю свiтлочутливого йонного каналу каналродопсину, як потенцiйного методу для вiдстеження регенерацiйного процесу пошкодженого периферичного нерва. Фотоактивацiя цих йонних каналiв у вiдновлених периферичних рецепторах потенцiйно може дозволити картувати зони вiдновлення iннервацiї. Спершу було проведене оперативне втручання з iн’єкцiєю векторiв $\mathrm{AAV}1-\mathrm{CAG}-\mathrm{ChR}2-\mathrm{mCherry}$ пiд епiневральну оболонку у проксимальному кiнцi сiдничного нерва в напрямку спинного мозку. Через п’ять тижнiв пiсля операцiї експресiю каналродопсину в периферичних закiнченнях було перевiрено за допомогою стимуляцiї свiтлом довжиною хвилi $450 \mathrm{~нм}$, яка викликала вiдсмикування оперованої кiнцiвки вiд скляної поверхнi. Результати свiдчать про те, що введення аденоасоцiйованих вiрусних векторiв має дiагностичний потенцiал у дослiдженнi вiдновлення периферичних нервiв пiсля травм.
Ключові слова: травма периферичного нерву; сiдничий нерв; каналродопсин 2; аденоасоцiйованi вiруснi вектори; iннервацiя; регенерацiя.
[ pdf ] (24.37 mb)
[ tex ] (14.41 mb)
